CulebrONT安裝筆記

基因體散彈槍定序的生物資訊工具很多，由於核酸定序的數據樣態隨著科技進步不斷改變，怎樣選擇這些生物資訊工具其實是個大問題。我們來試試這個CulebrONT，他可以用來運行各種的散彈槍定序組裝的生物資訊工具、修正(polishing)、甚至於(有必要的話)把序列圈起來等等，幫助你進行各種方案間的比較，讓使用者可以建構適合自己的理想工作流程，這篇是我們的安裝筆記。
CulebrONT發表原文出處

CulebrONT文件說明：https://culebront-pipeline.readthedocs.io/en/latest/index.html

實驗室的Z2工作站作業系統是Ubuntu，已經有安裝Python了，依照CulebrONT的安裝說明，我們還需要先另外安裝Ｒ與Graphviz，以下是用SSH遠端登入進行安裝的過程記錄：

1. 安裝R

R: https://cran.r-project.org

# update indices
$ sudo apt update -qq

# install two helper packages we need
$ sudo apt install --no-install-recommends software-properties-common dirmngr

# add the signing key (by Michael Rutter) for these repos
# To verify key, run gpg --show-keys /etc/apt/trusted.gpg.d/cran_ubuntu_key.asc 
# Fingerprint: E298A3A825C0D65DFD57CBB651716619E084DAB9
$ wget -qO- https://cloud.r-project.org/bin/linux/ubuntu/marutter_pubkey.asc | sudo tee -a /etc/apt/trusted.gpg.d/cran_ubuntu_key.asc

# add the R 4.0 repo from CRAN -- adjust 'focal' to 'groovy' or 'bionic' as needed
$ sudo add-apt-repository "deb https://cloud.r-project.org/bin/linux/ubuntu $(lsb_release -cs)-cran40/"

#installation
$ sudo apt install --no-install-recommends r-base

2. 安裝Graphviz

Graphviz: https://graphviz.org/download/

$ sudo apt install graphviz

3. 然後安裝CulebrONT：

$ python3 -m pip install culebrONT
culebrONT --help

#以下要下載超過4G的內容喔
$ culebrONT install_local

4. 還要裝Singularity

其實按照說明文件，原本到這個步驟就算裝完了，但是他會跑出一個「The singularity command has to be available in order to use singularity integration.」的錯誤警告。顯然是告訴我們，CulebrONT還得用到Singularity這個container platform，但我們….還沒有裝這個！所以以下就來安裝一下SingularityCE：
Singularity的網站有詳細安裝說明：https://docs.sylabs.io/guides/main/user-guide/quick_start.html#quick-installation-steps

4.1. 首先，系統裡面要先裝上一些libraries還有依賴的開發套件：

$ sudo apt-get install -y    wget    build-essential    libseccomp-dev    libglib2.0-dev    pkg-config    squashfs-tools    cryptsetup    runc

4.2. 安裝GO：

SingularityCE是用GO寫的，需要安裝GO。可到https://go.dev/dl/ 下載到Linux的版本：

#用wget下載
$ wget https://go.dev/dl/go1.20.4.linux-amd64.tar.gz
#解壓縮
$ sudo tar -C /usr/local -xzvf go1.20.4.linux-amd64.tar.gz
#把環境變數設給它
$ echo 'export PATH=/usr/local/go/bin:$PATH' >> ~/.bashrc && \
  source ~/.bashrc

4.3. 到GitHub下載SingularityCE 3.11.3的Source Code回來，解壓縮：

#下載
wget https://github.com/sylabs/singularity/releases/download/v3.11.3/singularity-ce-3.11.3.tar.gz
#解壓縮
tar -xzf singularity-ce-3.11.3.tar.gz

4.4. 編譯與安裝SingularityCE

$ cd singularity-ce-3.11.3
$ ./mconfig && \
    make -C builddir && \
    sudo make -C builddir install

這樣SingularityCE就可以用了，馬上來測試一下看看。

5. CulebrONT測試包的下載與測試：

說明文件寫說CulebrONT有提供測試包可以使用，我們照著把他抓回來裝在test底下

#這會下載300多MB的測試包到test裡面
$ culebrONT test_install -d test

然後測試看看：

$ culebrONT run_local -t 8 -c test/data_test_config.yaml --singularity-args "--bind $HOME"

測試成果的結果會放在FINAL_RESULTS底下，是個漂亮的html報告，用網頁瀏覽器可以閱讀。